Трипсинация - бұл трипсинді, ақуыздарды ыдырататын протеолитикалық ферментті пайдаланып, жабысқан жасушаларды олар өсірілетін ыдыстан ажырату үшін жасуша диссоциациясы процесі. Жасуша культурасына қосылғанда, трипсин жасушалардың тамырға жабысуына мүмкіндік беретін ақуыздарды ыдыратады.
Неліктен біз жасушаларды трипсизациялаймыз?
Трипсинация көбінесе жасушалардың жаңа контейнерге өтуіне рұқсат беру, эксперимент үшін бақылау немесе пайыздық мөлшерді алып тастау арқылы колбадағы қосылу дәрежесін төмендету үшін жасалады. ұяшықтар.
Трипсин жасушаларды ажырату үшін қалай жұмыс істейді?
Трипсин/ЭДТА – жасушаларды ажыратуға арналған аралас әдіс. Трипсин егер жоғары ағындағы амин қышқылыпролин болмаса, адгезия ақуыздарының амин қышқылын лизин немесе С-терминалындағы агининде кесу арқылы жасуша-жасуша және жасуша-матрица әрекеттесуіндегі адгезия ақуыздарын кеседі.
Трипсинделген жабысқақ жасушаларды қалай алуға болады?
Процедура
- Аспирация арқылы қоректік ортаны культура сауытынан алыңыз және моноқабатты Ca2+ және Mg жоқ тұз ерітіндісімен жуыңыз. Сарысудың барлық іздерін кетіру үшін 2+. …
- Жасушалардың моноқабатын толығымен жабу үшін өсіретін ыдысқа(лар)ға жеткілікті трипсин немесе трипсин/ЭДТА ерітіндісін құйыңыз және ~2 минутқа 37 °C инкубаторға қойыңыз.
Жасуша мәдениетіндегі трипсинді қалай өшіруге болады?
Ұяшықтар бөлінгеннен кейін 2 том қосыңыз трипсинді инактивациялау үшін алдын ала қыздырылған толық өсу ортасының. >95% жасушалардың қалпына келуін қамтамасыз ету үшін жасуша қабатының бетіне бірнеше рет тамшуыр арқылы ортаны ақырын таратыңыз. Сарысусыз дақылдар үшін, соя трипсин ингибиторы (өнім №
