Сіз сондай-ақ үлгіні ультрасүзгілеу арқылы алдыңғы көлемнің оннан бір бөлігіне дейін тұзсыздандыруға болады, ол қайтадан сұйылтылып, UF қадамын қайталаңыз. Тұзсыздандырудың ең жақсы әдісі - ультрасүзгілеуге (классикалық, центрифугалық емес) қарағанда, 50 мМ буферге қарсы гельді сүзу арқылы тұзсыздандыру.
Белокты тазартуда тұзсыздандыру дегеніміз не?
Тұзсыздандыру ақуыз ерітінділеріндегі тұздарды, фенол немесе біріктірілмеген нуклеотидтерді нуклеин қышқылдарынан немесе конъюгацияланған ақуыздардан артық айқаспалы немесе таңбалау реагенттерінен тазарту үшін қолданылады.
Белоктарды қалай тазартасыз?
Белоктарды жаппай тазарту кезінде белоктарды оқшаулаудың жалпыға ортақ бірінші қадамы - аммоний сульфатымен төгу (NH4) 2SO4. Бұл аммоний сульфатының ұлғайған мөлшерін қосу және тұндырылған ақуыздың әртүрлі фракцияларын жинау арқылы орындалады. Одан кейін аммоний сульфатын диализ арқылы жоюға болады.
Алмасу ақуыздарын қалай буферлейсіз?
Буферлік алмасу алғашқыүлгінің аяқталуы тиіс буфері бар баған шайырымен теңестіру арқылы жүзеге асырылады. Екі жағдайда да үлгіні тасымалдайтын буфер құрамдастары баған баған алдын ала теңестірілген ерітіндімен ауыстырылады.
Төмендегі хроматография техникасының қайсысын белоктарды тұзсыздандыру үшін қолдануға болады?
Жоғарыда айтылғандай, гельді фильтрация ақуыз үшін тиімді пайдалануға боладытұзсыздандыру және алдымен гельді сүзу колоннасын сумен теңестіру арқылы орындалады. Дегенмен, буфер алмасу алдымен баған шайырын мақсатты буфермен теңестіру арқылы орындалады.
