Люциферин - люцифераза экспрессиясының in vitro кескінін алу үшін пайдаланылатынқарапайым биолюминесцентті репортер. Firefly люцифераза ферментіне арналған суда еритін бұл субстрат (әдетте Photinus pyralis-тен алынған) оттегі бар кезде тән сары-жасыл эмиссияны шығару үшін ко-факторлар ретінде ATP және Mg2+ пайдаланады.
D-Luciferin не істейді?
Люциферин - люцифераза экспрессиясын in vivo кескіндеу үшін қолданылатын қарапайым биолюминесцентті репортер. Оттегі люцифераза ферментіне арналған суда еритін бұл субстрат оттегі бар кезде тән сары-жасыл эмиссияны шығару үшін кофакторлар ретінде ATP және Mg2+ пайдаланады., ол 37°C температурада in vivo қызыл шамға ауысады.
D-Люциферин калийі дегеніміз не?
Толығырақ. D-Luciferin калий тұзы Firefly Luciferase ферменті үшін пайдалы субстрат болып табылады. Люцифераза ферментімен тотығу кезінде биолюминесценция түзіледі. D-Luciferin қызығушылық промоторымен байланысты люцифераза генінің экспрессиясын талдау үшін пайдаланылуы мүмкін.
Д-Люциферинді қалай жасайсыз?
1. Стерильді суда 200X люциферин ерітіндісі (30 мг/мл) дайындаңыз. Люциферин толығымен ерігенше инверсия арқылы ақырын араластырыңыз. Бірден пайдаланыңыз немесе болашақта пайдалану үшін -20°C температурада аликвот және мұздатыңыз.
Люциферинді қалай енгізесіз?
(Люциферин әдетте құрсақішілік немесе көктамыр ішіне енгізіледі.) Мысал: 10 мкл инъекция. Дене салмағының грамына шаққанда люциферин ерітіндісі (қалыпты 150 мг/кг инъекция үшін 20 г тышқан үшін әдетте ~200 мкл). 5. Максималды люцифераза сигналының үстіртіне дейін суретке түсірмес бұрын 10-20 минут күтіңіз.
