Молекулалық салмақ неғұрлым үлкен болса, катушкалар соғұрлым ұзағырақ және молекула соғұрлым баяу жүреді. Сонымен, электрофорез + SDS нативті заряд бойынша емес, молекулалық массасы бойынша бөлінеді. Маңызды ескерту: Ұзындығы бірдей белоктарды әдетте гельдік электрофорез + SDS көмегімен бөлуге болмайды.
Молекулярлық салмағы бірдей белоктарды қалай ажыратуға болады?
Центрифугалау, электрофорез және хроматография белоктарды тазарту мен талдаудың ең кең тараған әдістері болып табылады. Центрифугалау ақуыздарды олардың массасы мен пішіні әсер ететін шөгу жылдамдығына қарай бөледі.
Белоктарды зарядқа қарай қандай әдістермен бөледі?
Белоктарды олардың таза заряды негізінде ион алмасу хроматографиясы арқылы бөлуге болады. Егер ақуыздың рН 7-де таза оң заряды болса, ол әдетте құрамында карбоксилат топтары бар түйіршіктер бағанымен байланысады, ал теріс зарядталған ақуыз байланыспайды (4.4-сурет).
Төмендегі әдістердің қайсысы ақуыздарды молекулалық салмаққа қарай бөлуге ең қолайлы?
Бөлуге негізделген хроматография әдістері бөлуде және шағын молекулаларды аминқышқылдары, көмірсулар және май қышқылдары ретінде анықтауда өте тиімді. Дегенмен, аффинді хроматографиялар (яғни ион алмасу хроматографиясы) нуклеин қышқылдары және белоктар ретінде макромолекулаларды бөлуде тиімдірек.
Бағанның қай түріхроматография белоктарды молекулалық массасына қарай бөледі?
Гельді фильтрациялау (GF) хроматографиясы белоктарды тек молекулалық өлшеміне қарай бөледі. Бөлу кеуекті матрица арқылы жүзеге асырылады, оған молекулалар стерикалық себептерге байланысты қол жеткізудің әртүрлі дәрежелері бар, яғни кішірек молекулалар көбірек қол жеткізе алады және үлкенірек молекулалар матрицадан шығарылады.
